一种分离高纯度和活性细胞的分选技术

时间:2019-12-19 00:29 来源:seo 作者:杏鑫 点击量:

一种分离高纯度和活性细胞的分选技术

一种无外壳声荧光激活细胞分选(aFACS)系统,用于分离具有高细胞纯度和活性的脆弱生物细胞。信贷:SUTD

荧光激活细胞分选(FACS)是一种定量检测细胞生理、生化、免疫和分子生物学特性的现代细胞分析技术,它可以进一步从复杂的生物样品中分离出特定的细胞群子集。虽然现有的商用流式细胞仪具有相当准确的细胞分选能力,但仍存在一些固有的局限性。首先,目前的商用FACS体积庞大,价格极其昂贵,通常只能由共享的用户设施提供。其次,目前的分选机制需要通过一个小的喷嘴来产生含有细胞的气溶胶,这会引起较大的剪切应力,对细胞造成损伤。因此,有必要开发一种简单和生物兼容的方法来对生物细胞进行分类,不仅要具有高纯度,而且要保持高细胞活力和功能。

在这项研究中,由副教授Ye Ai博士领导的新加坡科技大学(SUTD)研究团队与新加坡国家心脏中心(NHCS)助理教授Chrishan Ramachandra合作,开发了一种无鞘声荧光激活细胞分选(aFACS)系统,用于单细胞水平的荧光检测和分离。微流体分选装置采用弹性惯性粒子聚焦将单元排列成一个文件,以提高分选精度和效率,而无需样品稀释。发达排序装置可以有效地集中1μm粒子也代表了大多数的最小大小

细胞分类

应用程序。在单细胞水平的荧光检测中,

单个细胞

转移到目标出口50μm宽高度聚焦声场。在开发的aFACS中使用温和的声学力提供了一种更生物相容性的分选解决方案,以帮助研究人员分离他们的目标细胞,同时保持较高的细胞存活率。

临床首席研究员Chrishan博士说:“人心肌细胞(CMs)来自诱导多能性

干细胞

(iPSCs)在了解各种心脏疾病的机制方面显示出巨大的潜力。由于这些iPSC-CMs是在个体的基础上产生的,它们包含了特定个体的基因组成,以及与之相关的任何心脏病易感性。因此,这些iPSC-CMs可用于在培养皿中模拟固有的心脏疾病,也可作为药物筛选平台,以确定新的、患者特异性的治疗方法。然而,纯化这些iPSC-CMs的能力是该领域的主要限制。现有的纯化技术导致大量细胞死亡。有一种技术可以净化iPSC-CMs,同时保持它们的生存能力是非常有利的心脏研究领域。”

技术首席研究员艾博士说:“与商用FACS系统相比,我们的aFACS在筛选脆弱的生物时表现出了良好的生物相容性

细胞

比如iPSC-CMs。此外,无外壳声学分选装置能够防止样品稀释和交叉污染使用一个单一的入口没有气溶胶产生。能够达到90%以上的分选纯度和回收率,在3-4%的范围内,细胞活力下降非常小。对相同的细胞样本进行测试后,商业流式细胞仪(FACS)分类后的细胞存活率下降了35-45%。”

更多信息:

分析化学

DOI: 10102 / acs.analchem.9b03021

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